→ Пцр хламидиоз кровь. Хламидии, определение ДНК (Chlamydia trachomatis, DNA) в соскобе эпителиальных клеток урогенитального тракта

Пцр хламидиоз кровь. Хламидии, определение ДНК (Chlamydia trachomatis, DNA) в соскобе эпителиальных клеток урогенитального тракта

Заражение хламидией трахоматис – частая неприятность для сексуально активных людей. Если они пренебрегают методами барьерной контрацепции и не отказывают себе в ежегодной смене сексуальных партнеров.

Особенности этого микроорганизма таковы, что они имеют все шансы не только проникнуть в организм человека. При любом виде коитуса (вагинальном, анальном, оральном), хламидии успешно попадают внутрь клеток, образуя внеклеточную форму (элементарное тельце). И пережидают неблагоприятные времена в виде вегетативных L-форм. Эта разновидность инфекционных агентов проявляет свойства бактерии и вируса одновременно. Обладают собственной двойной мембраной и клеточным содержимым. Внутриклеточный кокк, тем не менее, активно пользуется органеллами клеток хозяина. Размножается в них и выбирается в межклеточное пространство в уже размноженном состоянии. Для удачного прикрепления к поверхности клетки многослойного плоского эпителия половых путей, мочевыводящего тракта, элементарное тельце во внешней части своей оболочки имеет специфические белки.

Патогенность микроорганизма тем лучше, чем активнее он выделяет внутренний токсин. При попытке избавиться от него антисептиками или методами физического воздействия, возбудитель трансформируется. Образует неделящуюся форму, которая умудряется избежать даже воздействия ряда антибиотиков. Все это определяет высокую инфицированность населения Земли (до10% взрослого мужского населения и до 30 процентов женщин). Инфекция способна длительно находиться в организме в скрытой форме.

Дает хроническое течение хламидийным инфекциям половых органов, мочевыводящих путей, ротоглотки, сердечнососудистой системы, суставов, глаз. Мощные белковые антигены хламидий нередко запускают и каскады аутоиммунных процессов с выработкой антител против собственных тканей и органов человека.

Результатом этого становятся аутоиммунные тиреоидиты, синовииты, системные заболевания соединительной ткани и суставов. Хламидия сохраняет за собой лидирующие позиции в качестве виновника вторичного женского и мужского бесплодия. Поэтому актуальность своевременной и достоверной диагностики хламидиоза чрезвычайно высока.

ПЦР на хламидии

Практически универсальным биологическим материалом для исследования становится венозная кровь, забранная натощак.

Однако следует помнить, что очаг поражения инфекцией может располагаться в местах далеких от вены, из которой забиралась кровь. Рекомендуется выполнять исследование соскобов эндотелия мочевыводящих и половых путей. Т.е. уретры, влагалища, цервикального канала. Также соскобы из прямой кишки, рта, глотки, конъюнктивального мешка. Возможна диагностика с использованием мочи, спермы, простатического секрета, цереброспинальной жидкости, слюны, раневого отделяемого или смывов. То есть на анализ направляется материал из очага воспаления. Данная методика позволяет получить результат в течение первых суток от доставки материала в лабораторию. Может считаться экспресс-методом. Метод качественный. Ответ лаборатория выдает в виде отметки на бланке: “обнаружено” (положительный) и “не обнаружено” (отрицательно). Расшифровка должна обязательно быть показана лечащему врачу. В ходе анализа ведется поиск фрагментов хламидийной специфичной дезоксирибонуклеиновой кислоты. Порог чувствительности – это 100 копий ДНК в образце. В отличие от бактериоскопии и посевов, где границей нормального бактериального роста считается 10 в 4 степени колониеобразующих единиц.

Показания для обследования:

  • Клиника урогенитального хламидиоза (дизурия, выделения из уретры или влагалища).
  • Подозрение на хламидиоз мочевыводящих путей или гениталий.
  • Поиск внутриутробной инфекции.
  • Планируемая беременность (за 2месяца), в том числе, ЭКО.
  • Наступившая беременность (при беременности тесты проводятся до 22 недель или при наличии клиники половой инфекции).
  • Мужское бесплодие, тератозооспермия, астенозооспермия.
  • Женское бесплодие (особенно вторичное).
  • Невынашивание беременностей, преждевременные роды, смерть ранее рожденных младенцев в постнатальном периоде, уродства или задержки внутриутробного развития у плодов.
  • Эпизоды незащищенного секса.
  • У лиц, имевших за последние двенадцать месяцев двух и более половых партнеров.
  • С целью оценки излеченности от хламидиоза (с момента окончания антибактериального курса должно пройти не менее тридцати суток).

Гемотест предполагает забор венозной крови натощак (предшествующий прием пищи за четыре часа до исследования).

У женщин полимеразная цепная реакция соскобов эндотелия цервикального канала или влагалища и уретры предпочтительно выполнять в первой половине менструального цикла. Не ранее пятых суток от начала последней менструации). Если исследование проводят о вторую половину цикла, то оно должно отстоять от следующего менструального кровотечения на семь-пять дней. Забор материала может проводиться в день обращения. Для соскоба из уретры обязательно воздержание от мочеиспускания в течение двух часов до анализа.

Если возможно провести предварительную подготовку к исследованию. То она должна исключить применение местных антисептиков за две недели до исследования. Пероральных антибиотиков–за месяц. В день забора материала и накануне противопоказано спринцевание. Соскобы выполняются во время осмотра гинекологом или венерологом на кресле. Материал забирается из влагалища, цервикального канала и уретры.

Как сдавать мужчинам соскобы, чтобы результат был максимально достоверным?

  • Не применять антибиотики внутрь в течение месяца, местные антисептики – четырнадцать суток.
  • Не заниматься сексом и не мастурбировать 48 часов.
  • Не мочиться два часа.

Соскоб выполняется из уретры на приеме у уролога или венеролога. Для этого в уретру на глубину 4 сантиметров вводится урологический зонд. При необходимости соскобы выполняются из области прямой кишки. ротоглотки или конъюнктивы глаз.

Как собирается моча?

В стерильную лабораторную посуду (обычно одноразовый пластиковый контейнер) собирают 20-30 мл утренней мочи. Эякулят собирается в день исследования лаборатории. Простатический секрет – урологом после массажа простаты. Требования к подготовке аналогичны таковым при сборе материала соскобов из уретры.

Выявление ДНК хламидий в цереброспинальной жидкости требует спинальной пункции в условиях специализированного стационара. Могут ли быть ситуации, когда ДНК не определяется при ПЦР? Да, если хламидий в организме нет или количество копий ДНК ниже пороговой чувствительности исследования. В случаях микст-инфекций (например, хламидиоз и герпес, хламидиоз и трихомонады или гонококки) могут потребоваться дополнительные ПЦР или серологические исследования на другие группы возбудителей половых инфекций.

Анализ ПЦР хламидии

На сегодня ПЦР один из самых прогрессивных и достоверных методов диагностики хламидиоза разных локализаций.

ПЦР имеет ряд преимуществ перед другими методами лабораторной диагностики:

  • Обладает очень высокой чувствительностью к ДНК возбудителя.
  • Стопроцентно специфична. То есть не принимает генетический материал хламидий за аналогичный других возбудителей, не путает хламидий с другими клетками и инфекционными агентами.
  • Может применяться в период до развития клиники (в инкубации). При стертом течении или хроническом варианте инфекции дает такие же точные результаты, как и при остром процессе.
  • Нет строгой привязки к конкретному биологическому материалу: исследоваться могут разные клетки и ткани организма.
  • Годится в качестве экспресс-метода. Делается в течение суток, реже до трех дней.
  • Ведется именно поиск возбудителя, а не косвенных признаков его присутствия (антитела крови).
  • В том же материале, который исследуется на предмет хламидиоза, могут быть методом ПЦР выявлены другие возбудители половых инфекций (уреаплазма, микоплазма, герпес).

Недостатков у методики немного. Однако они присутствуют:

  • Ложноположительные результаты. У пролеченных по поводу хламидиоза пациентов остатки ДНК возбудителя могут давать ложноположительный ответ анализа.
  • Прямая связь с качеством лаборатории. Приличный ПЦР-тест возможно провести только в лаборатории, оснащенной всеми расходными материалами. Поэтому в системе ОМС часто ПЦР-диагностику заменяют малоинформативной микроскопией.

Как сдавать анализ ПЦР и сколько стоит конкретное исследование, можно уточнять в лаборатории, где предстоит обследование.

ПЦР мазок на хламидии

В некоторых случаях возможно исследование мазков слюны методом полимеразной цепной реакции.

Показания к такому исследованию аналогичны таковым при выполнении соскобов из горла и рта. Это:

  • Подозрение на хламидиоз ротоглотки.
  • Стойкий кашель, сопровождаемый подъемами температуры.
  • Пневмонии неясного происхождения.
  • Лихорадка неясного генеза.

Условия, которые важно соблюсти перед забором материала на исследование:

  • Не проводить анализ на фоне лечения антибиотиком (мораторий две недели).
  • В течение шести часов до забора материала не орошать полость рта антисептиками и не пользоваться антибактериальными препаратами для рассасывания.
  • Непосредственно перед выполнением анализа прополоскать рот водой комнатной температуры.

Тест является качественным. Результаты интерпретируются аналогично таковым при ПЦР для других биологических материалов (кровь, соскобы эндотелия). В бланке ответа выставляется пометка “обнаружено” или “не обнаружено”. Сроки выполнения исследования – до двух суток. При необходимости – несколько часов. Полимеразная цепная реакция, как разновидность генотипирования хламидии трахоматис, является наиболее удобным методом.Это самое качественное выявление инфекционного агента в разные стадии инфекционного процесса. Сложности диагностики тем не менее присутствуют. Бесплатные клиники не имеют достаточного финансирования. Они не могут предложить своим пациентам ДНК-типирование на основные виды возбудителей половых инфекций бесплатно.

Нередко лаборатории этих лечебных учреждений попросту не снабжены расходными материалами для подобных исследований. Пациенту приходится направляться в частную лабораторию или клинику, в идеале сопряженную с этой лабораторией. Диагностика должна как предварять лечение, так и завершать его спустя месяц после антибактериального курса, оценивая эффект от проведенной терапии. Сдать тесты можно, обратившись к урологу, гинекологу или венерологу. Любой из этих специалистов не только назначит анализы, но и оценит их результаты, а также даст клинически грамотные рекомендации по ведению патологии.

Все знают, что такое грипп. Каждому более-менее известно, как себя вести, если произошло заражение, и какие препараты могут помочь. Рассказать о том, что такое хламидиоз, - смогут единицы. А уж о том, какие симптомы у этого заболевания и насколько оно опасно - и того меньше. Между тем хламидиоз является вторым по распространенности инфекционным заболеванием после гриппа. Если игнорировать его проявления, можно нанести серьезный и даже непоправимый вред здоровью.

Что такое хламидиоз и когда стоит сдать анализ

Хламидиоз - это заболевание, передающееся половым путем, его возбудителем является хламидия - Chlamydia trachomatis . Инфекция поражает мочеиспускательный канал, прямую кишку, влагалище, шейку матки и даже глаза (при орогенитальном контакте либо через бытовые предметы). В большинстве случаев заражение происходит во время половых контактов, реже - бытовым путем. Также вероятен вертикальный способ передачи инфекции (от матери к ребенку), в том числе трансплацентарный.

Инкубационный период длится около двух недель. В это время инфекционные агенты встраиваются в здоровые клетки и начинают активно размножаться. Симптомы заражения проявляются на 2–3 неделе, они выражаются в выделениях из мочеиспускательного канала у мужчин и из влагалища - у женщин, отмечается боль при мочеиспускании. Кроме того, женщины ощущают тянущую боль внизу живота, могут столкнуться с межменструальными кровотечениями.

Обратите внимание
В 50–70% случаев хламидиоз протекает бессимптомно и диагностируется только тогда, когда пара приходит к врачу с жалобой на неспособность зачать ребенка.

Если симптомов заболевания не возникло или если они были проигнорированы, то болезнь переходит в хроническую форму. У женщин хламидии становятся причиной воспалительных процессов в органах малого таза и брюшной полости, в маточных трубах образуются спайки, которые впоследствии становятся причиной женского бесплодия. У мужчин хламидии вызывают воспаление придатка яичка - эпидидимит, который грозит бесплодием и импотенцией.

Анализ на хламидиоз нужно сдать, если появились описанные выше симптомы, а также если имел место половой контакт, незащищенный барьерным методом контрацепции с человеком, о состоянии здоровья которого ничего не известно.

Какие анализы сдать для определения хламидиоза

Для анализа берут кровь, мочу либо мазок - это зависит от вида исследования. Какие они бывают и в чем особенности каждого - рассмотрим далее.

  • Экспресс-тест
    Такой тест можно купить в аптеке и провести дома самостоятельно. Материалом для исследования является моча, у женщин допустим также мазок. Биоматериал помещают на кассету и наблюдают - появится одна красно-фиолетовая полоска или две. Тест основан на выявлении липополисахаридного антигена (LPS). Точность экспресс-теста не превышает 20%, поэтому рекомендуется обращаться в клинику для получения достоверного результата.
  • Цитоскопический метод
    Для проведения анализа производится забор уретрального мазка у мужчин и цервикального - у женщин. Биоматериал распределяют на предметном стекле, высушивают и погружают в метанол или ацетон, после чего рассматривают под микроскопом. Таким образом в мазке пытаются выявить цитоплазматические клетки-включения Гальберштедтера-Провачека, свидетельствующие о хламидиозе. Данный метод является достоверным, однако он эффективен лишь для выявления инфекции в острой стадии. В хронической форме заболевание может протекать без наличия клеток-включений, а значит, зафиксировано не будет.
  • ИФА
    Метод иммуноферментного анализа предполагает поиск в венозной крови антигенов хламидий (IgG, IgA, IgM). С помощью ИФА можно диагностировать заболевание, выявить его возбудителя, а также определить - на какой стадии находится болезнь. Точность метода составляет 60%. Анализ крови на хламидии могут назначить не только при подозрении на заболевание, но также при бесплодии неясного генеза или во время беременности, если в анамнезе есть случаи невынашивания.
  • ПЦР
    Суть метода заключается в расшифровке небольшого участка ДНК, анализ фрагмента которой и помогает выявить хламидию. Материалом для исследования методом ПЦР служит урогенитальный мазок. Достоинствами метода являются его высокие чувствительность и точность. Инфекцию можно выявить не только в острой стадии, но и в скрытой или вялотекущей. Анализ назначают при бесплодии неясного генеза и при беременности с осложнениями. Кроме того, исследование назначают для контроля эффективности курса антибактериальной терапии. Следует учитывать, что после курса химиотерапии возможен ложноположительный результат анализа на хламидии. В таком случае требуется повторное исследование иным способом. Также анализ назначается лицам, больным туберкулезом, вирусным гепатитом, ВИЧ-инфицированным.

Кстати
В 1993 году американский ученый Кэрри Мюллис за открытие метода ПЦР был удостоен Нобелевской премии.

  • Посев на хламидии
    Также этот метод называют культуральным, он является «золотым стандартом», так как наиболее точен (100% чувствительность) и позволяет не только выявить возбудителя, но его реакцию на различные антибиотики. Это необходимо для назначения терапии заболевания. Также бактериальный посев назначают больным после прохождения курса антибактериальной терапии - для оценки ее результатов. Суть бакпосева состоит в том, что биоматериал «высеивают» в благоприятную среду и выращивают. Через несколько дней по характеру и размеру колонии определяют, какая именно инфекция присутствует в материале.

Итак, на сегодняшний день наиболее точными являются ПЦР и бактериальный посев. Остальные методы диагностики хламидий обычно используют как дополнительный способ исследования, позволяющий подтвердить диагноз или поставить его под сомнение.

Как подготовиться и как сдавать биоматериал на выявление хламидии

Для того чтобы получить достоверный результат, сдавать биоматериал следует в медицинском учреждении, а последующие обработка и анализ должны осуществляться в специализированной лаборатории.

Накануне забора биоматериала следует отказаться от употребления алкоголя, острой и жирной пищи. На 1–2 суток перед посещением врача следует воздержаться от половых контактов. Нельзя сдавать анализ на хламидии во время приема антибиотиков.

За час до сдачи крови нужно отказаться от курения. Важно не нервничать, не испытывать эмоциональных перегрузок перед исследованием.

Если требуется сдать мазок , то мужчинам рекомендуется не мочиться в течение 1–2 часов до забора материала. Женщинам следует сдавать материал на 5–7 день менструального цикла. У девочек забор биоматериала производится со слизистой оболочки преддверия влагалища.

Мочу для анализа собирают утром, требуется средняя порция мочи. То есть первые капли спускают в унитаз, а последующие - собирают в стерильный контейнер. Для исследования требуется примерно 50 мл жидкости. Перед сбором материала стоит ополоснуть наружные половые органы теплой водой, использовать при этом мыло, гели и другие средства гигиены запрещено.

Если пациент на момент сдачи анализа проходит медикаментозный курс лечения какого-либо заболевания, об этом обязательно нужно сообщить специалисту.

Расшифровка результатов анализов на хламидии

Результаты анализов на хламидиоз обычно готовятся в течение 1–3 рабочих дней, некоторые платные учреждения предоставляют услугу срочного анализа, тогда пациент может получить заключение уже через несколько часов после забора материала. Исключение составляет бактериологический посев, на это исследование требуется несколько дней, обычно - 5–7.

Иммуноферментный анализ

При анализе биоматериала на хламидиоз методом ИФА используют понятие «титр». Рассматриваются титры антигенов IgG, IgA, IgM. В таблице ниже приведены значения и расшифровка.

Стадия заболевания

Титры IgG

Титры IgA

Титры IgM

Острая

>100–6400

> 50–1600

> 50–3200

Хроническая

>100–1600

<50

>50–200

Обострение хронического заболевания или повторное инфицирование

>100–51200

>50–400

<50

Состояние выздоровления

> 100–400

<50

<50

В организме здорового человека антигенов не обнаруживается. Антигены типа IgM появляются спустя 5 дней после заражения. IgG - спустя 10 дней. IgA - через 2–3 недели. Пограничные значения: титры IgM и IgА - до 50, IgG - до 100 - требуют повторного обследование пациента через 10–14 дней.

ПЦР

Является качественным анализом, поэтому в бланке с результатами может значиться: «обнаружено» или «не обнаружено».

Посев

В лабораторном заключении первым пунктом будет значиться название инфекции, найденной в биоматериале. Далее - ее концентрация, указанная в колониеобразующих единицах на миллилитр (КОЕ/мл). Одна клетка дает рост целой колонии. Результат свыше 103 КОЕ/мл говорит о протекающем в организме воспалительном процессе, вызванном этим возбудителем. Также в результате будет приведен список антибиотиков, с помощью которых борются с хламидиями. Если возле антибиотика стоит буква «R» - значит, бактерия резистентна (устойчива) к нему, антибиотик на нее не подействует. А если стоит буква «S», значит, к этому антибиотику хламидия чувствительна, его можно назначать в качестве терапии заболевания.

Клиническая картина хламидиоза характеризуется скрытым течением, абсолютно бессимптомным или малосимптомным. Заболевание опасно осложнениями, влекущими бесплодие, невынашивание, поражения половых органов. На сегодняшний день существует несколько способов диагностики хламидиоза, но ни один из них не дает 100-процентного ответа. Если один из тестов оказывается положительным, то обязательно назначают дополнительные исследования. Трактовать результаты и назначать лечение может только специалист.

Среда, 28.03.2018

Мнение редакции

Если у вас на­шли бак­те­рию, обя­за­тель­но нуж­но об­сле­до­вать­ся и ва­ше­му по­ло­во­му парт­не­ру. Да­же если ка­жет­ся, что его ни­че­го не бес­по­ко­ит. Слу­ча­ет­ся, что симп­то­мы за­бо­ле­ва­ния про­яв­ля­ют­ся толь­ко у од­но­го парт­не­ра, тог­да как вто­рой про­дол­жа­ет хо­ро­шо се­бя чувст­во­вать. Но бес­симп­том­ное те­че­ние бо­лез­ни не сни­жа­ет риск ос­лож­не­ний. Од­но­му парт­не­ру нет смыс­ла ле­чить­ся - в этом слу­чае бо­лезнь по­сто­ян­но бу­дет «ко­че­вать» от од­но­го к дру­го­му и мо­жет при­вес­ти к тя­же­лым по­следст­ви­ям.

Иследование методом ПЦР на хламидии является одним из самых эффективных способов определения инфекции в организме. Выявить хламидиоз своевременно достаточно тяжело, ведь в ряде случаев эта патология может иметь бессимптомное или атипичное течение. Последствиями инфицирования становятся серьезные проблемы со здоровьем, избежать которых позволит лишь точное и быстрое выявление возбудителя самыми надежными методами.

Что такое ПЦР?

Любая живая клетка – будь то вирус или бактерия, имеет ядро с содержащимися в нем молекулами ДНК и РНК. Соединения данного типа для каждого микроорганизма уникальны, поэтому их выделение в исследуемом материале помогает врачу определить вид инфекции и поставить абсолютно точный диагноз. Но обнаружить ДНК вируса в биологических образцах непросто из-за низкой концентрации этих молекул в анализируемом веществе, поэтому обычные диагностические методики в данном случае не действуют.

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) была создана именно с целью устранения этой проблемы. Исследование предполагает особую обработку биоматериала, которая направлена на увеличение в нем количества ДНК возбудителя, в том числе и хламидии. Такой прием дает возможность определить вид инфекции и установить возбудителя болезни. В дальнейшем, на основании ПЦР врач сможет быстро поставить правильный диагноз и начать соответствующее лечение пациента.

Преимущества метода

Существует множество различных тестов и анализов, применяемых с целью определения венерических заболеваний. Если сравнивать их с данной методикой, можно отметить следующие преимущества полимеразной цепной реакции:

  • повышенная чувствительность – это свойство позволяет точно установить тип инфекции (микоплазмы, хламидии, уреаплазмы) как в острую, так и в хроническую стадию течения болезни;
  • быстрый результат – обследование ПЦР на хламидии выполняется в сжатые сроки;
  • специфичность – своеобразие этого способа диагностики помогает более внимательно изучить анализируемый материал.

Важно! Если исследование проводиться в острый период заболевания, ПЦР определяет даже минимальные количества хламидийной инфекции, присутствующие в организме больного.

Даже в хроническую стадию патологии, когда выделить возбудителя из биоматериала достаточно трудно, метод полимеразной цепной реакции прекрасно справляется с поставленной задачей.

Кому назначается анализ?

Полимеразную цепную реакцию используют в медицине с целью выявления хламидий — основной причины возникновения заболевания у женщин и мужчин. В частности, ПЦР позволяет установить правильный диагноз в тех случаях, когда клинические симптомы недуга сомнительные или стертые.

Показаниями для выполнения такого анализа является:

  • Наличие венерических и других болезней (туберкулеза, сифилиса, герпеса, ВИЧ или СПИДа, различных паппиломавирусов, гепатитов).
  • Генетические патологии (если требуется узнать риск развития каких-либо отклонений у ребенка).
  • Отсутствие подобных обследований (человек ни разу не проходил данный анализ).
  • Воспалительные реакции организма (когда не удается установить причину их проявления).
  • Наличие незащищенных сексуальных контактов в ближайшее время.
  • Планирование беременности или ее осложнения (исследование проходит и мужчина, и женщина).
  • При невозможности оплодотворения (определение первопричины бесплодия у обоих партнеров).
  • Установление особой чувствительности к антибактериальным средствам.

Читайте также по теме

Легочный хламидиоз у взрослых и детей

С чем связаны недостатки этого анализа?

Хоть данный анализ является высокоинформативным и точным способом выявления инфекции, он также имеет свои недостатки. Поскольку ПЦР – это современное и специфическое исследование биоматериала, необходимо соблюдать определенные условия во время его проведения.

Лаборатория, в которой выполняется этот метод диагностики, должна быть оснащена биологическими фильтрами, очищающими воздух в помещении. Такие меры предосторожности не дают различным микроорганизмам, присутствующим в окружающей среде, попасть в исследуемый образец. Ведь если кровь или другая биологическая жидкость загрязниться в процессе приготовления к данной процедуре – результаты обследования могут быть ложными.

Полимеразную цепную реакцию не всегда можно трактовать, как предельно точную диагностическую методику. Положительные или отрицательные результаты тестирования зависят от многих факторов. На исход этого исследования влияет не только качество анализируемого образца, но и стадия болезни.

В некоторых случаях ПЦР крови на хламидии может дать отрицательный ответ, даже если клинические симптомы патологии отчетливо указывают на наличие данной инфекции. В подобной ситуации причиной ошибки считают неудачный выбор образца биологического материала. Именно поэтому анализ ДНК на хламидии должен брать квалифицированный специалист в соответствии с инструкцией, которую предоставляет ему лаборатория.

Как подготовиться к анализу?

Достоверность результатов метода полимеразной реакции зависит не только от безупречной техники забора биоматериала, но и от качества подготовки самого пациента.

Сдавая анализ крови или другого исследуемого биологического вещества на ПЦР, рекомендуется соблюдать такие правила:

  • отменить прием антибактериальных лекарств на данный период;
  • полностью исключить половую жизнь за 2-3 недели до проведения обследования;
  • кровь на хламидии следует сдавать утром и натощак;
  • диагностику желательно выполнять в период обострения заболевания;
  • перед забором урогенитального мазка запрещается спринцевание исследуемой области;
  • нельзя проводить ПЦР во время менструации у женщин (разрешается только на 2-3 день после месячных);
  • образец мочи на хламидии берут утром, в стерильную посуду.

Не рекомендуется перед сдачей урогенитального мазка на полимеразную цепную реакцию посещать уборную за 3 часа до исследования. Накануне выполнения анализа, определяющего наличие хламидий и других инфекций в организме, следует воздержаться от похода в баню или сауну.

Как расшифровывается анализ?

Лаборатории представляют отчет об исследовании в традиционном виде, при котором не требуется пояснение, результат будет или «положительно» либо «отрицательно». Результат обследования ПЦР на хламидии готовиться на протяжении 1-3 суток. В некоторых учреждениях существует срочный анализ, который предоставляется платно. Заключение пациент получает «на руки» в течение 2-3 часов после выполнения диагностики.

Интересно! Кроме медицины, методику полимеразной цепной реакции используют в своей работе криминалисты для определения владельца биоматериала, обнаруженного на месте преступления. Также этот способ диагностики применяется с целью установления отцовства.

Какие еще есть исследования?

Существует не так много методов, определяющих наличие хламидий в организме. Материалом для такого анализа может служить мазок, кровь или моча – все зависит от целей обследования. Далее поговорим о том, какие же виды лабораторной диагностики различают, в чем суть каждого из них.

  • Цистоскопия. Для ее выполнения требуется образец цервикальной слизи (у женщин) либо мазок из уретрального канала (у мужчин). Биологические жидкости равномерно наносят на предметные стекла, а затем исследуют с помощью микроскопа. В анализируемом материале определяют особые клеточные включения, которые могут свидетельствовать о наличии хламидийной инфекции. Такая методика дает очень точные результаты, но применять ее можно только в остром периоде болезни. Хроническая форма патологии не сопровождается появлением клеток-включений, поэтому в данном случае цистоскопия не даст никакого эффекта.
  • Экспресс-тестирование. Подобный анализ проводиться пациентом самостоятельно с помощью специального теста, который приобретается в аптеке. В качестве биоматериала используют мочу либо мазок из цервикального канала (у женщин). Образец наносят на кассету в соответствии с инструкцией и наблюдают за появлением полос. Экспресс-тест определяет наличие специфического антигена (липополисахарида) хламидий. Данный вид исследования показывает правильный результат в одном случае из 5, поэтому его нельзя считать достоверным диагностическим методом.
  • Иммуноферментный анализ (ИФА). Суть этого обследования заключается в поиске особых иммуноглобулинов (антител) инфекции в крови пациента. ИФА позволяет провести качественную диагностику болезни, определить характеристики возбудителя, выяснить стадию недуга. Методика обладает высокой точностью – около 90%.

Хламидии – атипичная бактерия, передающаяся половым путем. В организме человека она в процессе своей жизнедеятельности вызывает хроническое воспаление органов малого таза, в мужском – орхит, уретрит или же простатит. Диагностировать данную патологию исключительно по клиническим проявлениям невозможно. Для этого необходимо проводить расширенную диагностику, которая включает в себя проведение лабораторных исследований. С их помощью также удается определить хламидиоз еще до того, как человек начнет ощущать на себе неприятные проявления этого заболевания.

Достаточно часто, чтобы определить хламидиоз, врачи назначают своим пациентам анализ ПЦР – полимерной цепной реакции. Он позволяет быстро и точно найти болезнетворных микроорганизмов в биологическом материале. В среднем результаты исследования готовятся за 1-2 дня. Из-за того, что тестирование в некоторых случаях дает ложноположительный результат, лечащие врач назначаются своим пациентам и другие методы исследования через некоторое время.

Что такое ПЦР?

ПЦР, или полимеразная цепная реакция, — один из наиболее важных анализов, позволяющих быстро определить хламидиоз . Его точность составляет 98%. Суть данного метода заключается в том, что во время анализа специалист ищет в биологическом материале частицы хламидий – их ДНК. Его можно чаще всего диагностировать в соскобе. Трахоматис – ДНК бактерии – имеет небольшой размер, однако в то же время содержит всю генетическую информацию об бактерии. Учитывайте, что если в организме присутствует даже небольшое количество хламидий, то анализ обязательно покажет это в результатах.

Из-за своей высокой точности многие врачи называют ПЦР – идеальным методов диагностики хламидиоза. Для исследования обычно берут соскоб со слизистой полового органа или же небольшое количество выделений. При наличии инфекции эти материалы всегда заражаются первыми. Кроме того, клиническое исследования на хламидиоз также проводится с мазка из прямой кишки, уретры, канала шейки матки, конъюнктивы глаза и задней стенки горла.

Несмотря на большое количество преимуществ, полимерная цепная реакция имеет ряд недостаток. В первую очередь нужно учитывать, что анализ не может сказать, какие клетки обнаруживаются в биологическом материале: живые или мертвые. Именно по этой причине ПЦР не может использоваться в качестве исследования, контролирующее эффективность лечения. Чтобы получить максимально точный результат, вам придется подготовиться к исследованию. Помните, что для получения точного результата вы за 1 месяц и во время лечения не должны употреблять антибиотики.

Положительный результат по ПЦР не всегда говорит о том, что в организме присутствует хламидиоз. Именно по этой причине врачи назначают пациенту сразу комплекс диагностических исследований. В то же время нужно помнить, что отрицательный показатель также не говорит о том, что бактериального заражения нет. Статистика показывает, что в 2-5% случаев врачи ставят ложный результат. Если же такой результат был получен, но признаки хламидиоза все-таки присутствуют, проводится дополнительное обследование.

Особенности

Основная особенность ПЦР как исследования на хламидии заключается в том, что для проведения данного обследования допустимо использовать абсолютно любой биологический материал. Для этого с успехом берут кровь, половые жидкости, секреты, мазки и соскобы.

Именно этот метод является максимально универсальным, а также удобным. Вы не будете испытывать никакого дискомфорта во время взятия материала, вы быстро получите достоверный результат. Обычно диагностировать хламидиоз при помощи ПЦР удается тогда, когда на поверхности слизистой оболочки появляются небольшие очаги воспаления. Правильность полученного результата зависит от того, как правильно вы подготовитесь к обследованию. Вы должны придерживаться следующих правил:

  • Отказаться от приема антибиотиков как минимум за месяц до сдачи анализа;
  • Отказаться от половых связей за неделю до забора биологического материала;
  • Проводить обследование необходимо во время обострения заболевания;
  • За 3 дня до исследования запрещено проводить спринцевание;
  • Отправлять на забор материала можно только по прошествии 3 часов с последнего мочеиспускания;
  • ПЦР не проводится во время менструации и 2 дня после нее.

Основная опасность хламидиоза таится в длительном бессимптомном протекании. Существуют случаи, когда бактерии обнаруживались спустя несколько лет после заражения. Именно по этой причине ПЦР – обязательное обследование, на которое отправляется человек для определения любых инфекций, передающихся половым путем. Также анализ проводится беременным женщинам, ведь хламидии способны нанести серьезный вред ребенку.

Ход реакции

Ход реакции

Проведение ПЦР включает в себя отдельных 20-20 циклов, каждый из которых включает в себя три отдельные стадии. В самом начале двухцепочечную ДНК-матрицу подогревают до 96 градусов на протяжении нескольких минут, чтобы цепи окончательно разошлись. Такое явление называют денатурацией – разрушением водородной связи. Смесь, в которую окунают ДНК, заранее разогревают, чтобы денатурация прошла максимально полно.

Когда цепи расходятся, температуру воздействия снижают. Это позволяет специальному праймеру связаться с одноцепочечной матрицей. Эту стадию принято называть отжигом. Рабочая температура на этом этапе зависит от вида праймера, обычно назначается на 4-5 градусов ниже, чем температура плавления. На этой стадии клетки ДНК проводят 1-2 минуты.

Во время ПЦР происходит реплицирование матричной цепи за счет воздействия праймером. Эту стадию принято называть элонгацией. Рабочая температура на этом этапе полностью зависит от полимеразы. В большинстве случаев эти препараты показывают высокую активность уже при 72 градусов. Длительность процедуры зависит как от типа ДНК-полимеразы, так и длинны амплифицируемого фрагмента. В большинстве случаев на одну минуту ставят несколько тысяч пар оснований. Когда все циклы будут завершены, врач проводит дополнительную или финальную элонгацию. Она позволяет достроить все одноцепочечные фрагменты. Длительность этой стадии может составлять около 10 минут.

Клинический материал для ПЦР

Клинический материал для ПЦР

Чтобы провести анализ ПЦР, врачу необходимо взять небольшое количество биологического материала. В его качестве может выступать кровь, образцы тканей, а также некоторые биологические жидкости. Специалист сам выберет, какой материал лучше всего использовать конкретно в вашем случае. Чаще всего берут для мужчин мазок из уретры, сок предстательной железы, эякулят, синовиальная жидкость.

Помните, что ПЦР на хламидиоз может проводится также детям. Такое обследование допустимо даже для малышей небольшого возраста и новорожденных. Они могут легко подхватить эту инфекцию во время прохождения по родовым путям. Помните, что во время менструации сдавать ПЦР запрещено. Это качественное исследование, которое показывает, присутствуют ли бактерии в мазке или нет. В норме их быть не должно.

Когда врачи отравляют своих пациентов на анализ ПЦР, это всегда вызывает переживания. Однако для беременных женщин такое обследование всегда является серьезным расстройством. Нужно учитывать, что во время вынашивания плода каждая женщина максимально остро относится к состоянию своего здоровья. Половые инфекции, проникшие в полость малого таза, способны серьезно подорвать здоровье беременной женщины. Кроме того, из-за них могут легко возникнуть серьезные отклонения в формировании внутренних органов плода, а также возникнуть выкидыш.

Чем раньше вам диагностируют хламидиоз и назначат эффективное лечение, тем выше шанс сохранить нормальное развитие у плода.

Анализ на ПЦР является составляющей частью обследования любой беременной женщины. Его проводят даже в том случае, если у женщины не менялся половой партнер на протяжении долгого времени. Помните, что хламидии способны долгое время жить в организме и не проявлять себя никакими симптомами. Однако при получении результатов анализа многие люди отмечают, что когда-то сталкивались с определенным дискомфортом. Женщины же легко могут определить патологию по часто повторяющейся молочнице или постоянному дискомфорту во влагалище.

 

 

Это интересно: