Результат проверки на ВИЧ: антитела и антигены. Прогностическая значимость выявления антигена ВИЧ р24 при использовании тест-систем с повышенной аналитической чувствительностью Как осуществляется изучение антител на ВИЧ

В настоящее время новые диагностические технологии позволяют выявить этиологические и патогенетические причины многих заболеваний и коренным образом повлиять на результаты лечения. Пожалуй, наиболее впечатляющие результаты внедрения этих технологий в клиническую практику достигнуты в области иммунологии и диагностики инфекционных заболеваний.

Тест-системы на основе иммуноферментного и иммунохемилюминесцентного анализа позволяют выявить антитела различных классов, что значительно повышает информативность методов клинической, аналитической чувствительности и специфичности для диагностики инфекционных заболеваний. Следует отметить, что наиболее значительные успехи в диагностике инфекций связаны с внедрением в лабораторную практику метода полимеразной цепной реакции, который считается «золотым стандартом» в диагностике и оценке эффективности проведенного лечения ряда инфекционных заболеваний.

Для исследования может быть использован различный биологический материал: сыворотка, плазма крови, соскоб, биоптат, плевральная или спинномозговая жидкость (СМЖ). В первую очередь, методы лабораторной диагностики инфекций направлены на выявление таких заболеваний, как вирусный гепатит В, С, D, цитомегаловирусная инфекция, инфекции, передающиеся половым путем (гонорейная, хламидийная, микоплазменная, уреаплазменная), туберкулез, ВИЧ-инфекция и др.

ВИЧ-инфекция - заболевание, вызываемое вирусом иммунодефицита человека (ВИЧ), длительное время персистирующего в лимфоцитах, макрофагах, клетках нервной ткани, в результате чего развивается медленно прогрессирующее поражение иммунной и нервной систем организма, проявляющееся вторичными инфекциями, опухолями, подострым энцефалитом и другими патологическими изменениями.

Возбудители инфекции - вирусы иммунодефицита человека 1-го и 2-го типов (ВИЧ-1, ВИЧ-2) - относятся к семейству ретровирусов, подсемейству медленных вирусов. Вирионы являются сферическими частицами диаметром 100-140 нм. Вирусная частица имеет наружную фосфолипидную оболочку, включающую гликопротеиды (структурные белки) с определенной молекулярной массой, измеряемой в килодальтонах. У ВИЧ-1 - это gpl60, gpl20, gp41. Внутренняя оболочка вируса, покрывающая ядро, также представлена белками с известной молекулярной массой - р17, р24, р55 (ВИЧ-2 содержит gpl40, gpl05, gp36, р16, р25, р55).

В состав генома ВИЧ входит РНК и фермент обратная транскриптаза (ревертаза). Для того чтобы геном ретровируса соединился с геномом клетки хозяина, вначале с помощью ревертазы происходит синтез ДНК на матрице вирусной РНК. Затем ДНК провируса встраивается в геном клетки-хозяина. ВИЧ обладает выраженной антигенной изменчивостью, значительно превышающей таковую у вируса гриппа.

В организме человека основной мишенью ВИЧ являются Т-лимфоциты, несущие на поверхности наибольшее количество СD4-рецепторов. После проникновения ВИЧ в клетку с помощью ревертазы по образцу своей РНК вирус синтезирует ДНК, которая встраивается в генетический аппарат клетки-хозяина (СD4-лимфоциты) и остается там пожизненно в состоянии провируса. Помимо Т-лимфоцитовхелперов поражаются макрофаги, В-лимфоциты, клетки нейроглии, слизистой оболочки кишечника и некоторые другие клетки. Причиной снижения количества Т-лимфоцитов (клетки CD4) является не только прямое цитопатическое действие вируса, но и их слияние с неинфицированными клетками. Наряду с поражением Т-лимфоцитов у больных с ВИЧ-инфекцией отмечается поликлональная активация B-лимфоцитов с увеличением синтеза иммуноглобулинов всех классов, особенно IgG и IgA, и последующим истощением этого отдела иммунной системы. Нарушение регуляции иммунных процессов проявляется также повышением уровня α-интерферона, β2-микроглобулина, снижением уровня IL-2. В результате нарушения функции иммунной системы, особенно при снижении числа Т- лимфоцитов (CD4) до 400 клеток в 1 мкл крови и менее, возникают условия для неконтролируемой репликации ВИЧ со значительным увеличением количества вирионов в различных средах организма. В результате поражения многих звеньев иммунной системы человек, зараженный ВИЧ, становится беззащитным перед возбудителями различных инфекций.

На фоне нарастающей иммунодепрессии развиваются тяжелые прогрессирующие заболевания, которые не встречаются у человека с нормально функционирующей иммунной системой. Это заболевания, которые Всемирная организация здравоохранения (ВОЗ) определила как СПИД-маркерные или СПИД-индикаторные заболевания.

СПИД-индикаторные заболевания

Первая группа - заболевания, присущие только тяжелому иммунодефициту (уровень СD4 <200). Клинический диагноз ставится при отсутствии анти-ВИЧ-антител или ВИЧ-антигенов.

Вторая группа - заболевания, которые могут развиваться как на фоне тяжелого иммунодефицита, так и в ряде случаев без него.

Поэтому в этих случаях необходимо лабораторное подтверждение диагноза.

Первая группа:

• кандидоз пищевода, трахеи, бронхов;
• внелегочный криптококкоз;
• криптоспоридиоз с диареей более 1 месяца;
• цитомегаловирусные поражения различных органов помимо печени, селезенки или лимфоузлов у больного в возрасте старше 1 месяца;
• инфекция, обусловленная вирусом простого герпеса, проявляющаяся язвами на коже и слизистой оболочке, которые персистируют более 1 месяца, а также бронхитом, пневмонией или эзофагитом любой продолжительности, поражающим больного в возрасте старше 1 месяца;
• генерализованная саркома Капоши у больных в возрасте до 60 лет;
• лимфома головного мозга (первичная) у больных в возрасте до 60 лет;
• лимфоцитарная интерстициальная пневмония и/или легочная лимфоидная дисплазия у детей в возрасте до 12 лет;
• диссеминированная инфекция, вызванная атипичными микобактериями (микобактерии комплекса М. aviumintracellulare) со внелегочной локализацией или локализацией (дополнительно к легким) в коже, шейных лимфатических узлах, лимфатических узлах корней легких;
• пневмоцистная пневмония;
• прогрессирующая многоочаговая лейкоэнцефалопатия;
• токсоплазмоз головного мозга у больных в возрасте старше 1 месяца.

Вторая группа:

• бактериальные инфекции, сочетанные или рецидивирующие, у детей в возрасте до 13 лет (более двух случаев за 2 года наблюдения): сепсис, пневмония, менингит, поражение костей или суставов, абсцессы, обусловленные гемофильными палочками, стрептококками;
• кокцидиоидомикоз диссеминированный (внелегочная локализация);
• ВИЧ-энцефалопатия (ВИЧ-деменция, СПИД-деменция);
• гистоплазмоз с диареей, персистирующей более 1 месяца;
• изоспороз с диареей, персистирующей более 1 месяца;
• саркома Капоши в любом возрасте;
• лимфома головного мозга (первичная) у лиц любого возраста;
• другие В-клеточные лимфомы (за исключением болезни Ходжкина) или лимфомы неизвестного иммунофенотипа: мелкоклеточные лимфомы (типа лимфомы Беркитта и др.); иммунобластные саркомы (лимфомы иммунобластные, крупноклеточные, диффузные гистиоцитарные, диффузные недифференцированные);
• микобактериоз диссеминированный (не туберкулез) с поражением помимо легких кожи, шейных или прикорневых лимфоузлов;
• туберкулез внелегочной (с поражением внутренних органов, помимо легких);
• сальмонеллезная септицемия, рецидивирующая;
• ВИЧ-дистрофия (истощение, резкое похудение).

В таблице 1 (см. ссылку на источник выше) приведены СПИД-индикаторные заболевания и их этиологические агенты.

Существует много классификаций СПИДа.

Согласно новой классификации, предложенной Центром по контролю за заболеваниями в США (табл. 2 - см. ссылку на источник выше), диагноз СПИДа устанавливается лицам, имеющим уровень CD4-лимфоцитов менее 200/мкл даже при отсутствии СПИД-индикаторных заболеваний.

Категория В включает различные синдромы, важнейшие из которых - бациллярный ангиоматоз, орофарингеальный кандидоз, рецидивирующий кандидозный вульвовагинит, трудно поддающийся терапии, цервикальная дисплазия, цервикальная карцинома, идиопатическая тромбоцитопеническая пурпура, листериоз, периферическая нейропатия.

Антитела к ВИЧ-1 и ВИЧ-2 в крови

Антитела к ВИЧ-1 и ВИЧ-2 в сыворотке крови в норме отсутствуют.

Определение антител к ВИЧ является основным методом лабораторной диагностики ВИЧ-инфекции. В основе метода лежит иммуноферментный анализ (ИФА) - чувствительность более 99,5%, специфичность - более 99,8%. Антитела к ВИЧ появляются у 90-95% инфицированных в течение 1 месяца после заражения, у 5-9% - через 6 месяцев, у 0,5-1% - в более поздние сроки. В стадии СПИДа число антител может снижаться вплоть до полного исчезновения.

Результат исследования выражается качественно: положительный или отрицательный.

Отрицательный результат исследования указывает на отсутствие антител к ВИЧ-1 и ВИЧ-2 в сыворотке крови. Отрицательный результат лаборатория выдает сразу по его готовности. При получении положительного результата - выявлении антител к ВИЧ - во избежание ложноположительных результатов в лаборатории анализ повторяют еще 2 раза.

Иммуноблоттинг на антитела к вирусным белкам ВИЧ в сыворотке крови

Антитела к вирусным белкам ВИЧ в сыворотке крови в норме отсутствуют.

Метод ИФА по определению антител к ВИЧ является скрининговым. При получении положительного результата для подтверждения его специфичности используется метод иммуноблоттинга - Western-blot - встречная преципитация в геле антител в сыворотке крови больного с различными вирусными белками, подвергнутыми разделению по молекулярной массе с помощью электрофореза и нанесенными на нитроцеллюлозу. Определяются антитела к вирусным белкам gp41, gpl20, gpl60, р24, pi8, р17 и др.

Согласно рекомендациям Российского центра по профилактике и борьбе со СПИДом обнаружение антител к одному из гликопротеидов gp41, gpl20, gpl60 - следует считать положительным результатом. В случае выявления антител к другим белкам вируса результат считается сомнительным, такого пациента следует обследовать дважды - через 3 и 6 месяцев.

Отсутствие антител к специфическим белкам ВИЧ означает, что иммуноферментный метод дал ложноположительный результат. Вместе с тем, в практической работе при оценке результатов метода иммуноблоттинга необходимо руководствоваться инструкцией, прилагаемой фирмой к используемому «Набору для иммуноблоттинга».

Метод иммуноблоттинга применяется для лабораторной диагностики ВИЧ-инфекции.

Антиген р24 в сыворотке крови

Антиген р24 в сыворотке крови в норме отсутствует.

Антиген р24 представляет собой белок стенки нуклеотида ВИЧ. Стадия первичных проявлений после инфицирования ВИЧ является следствием начала репликативного процесса. Антиген р24 появляется в крови спустя 2 недели после инфицирования и может быть выявлен методом ИФА в период от 2 до 8 недель. Через 2 месяца от момента инфицирования антиген р24 исчезает из крови. В дальнейшем в клиническом течении ВИЧ-инфекции отмечается второй подъем содержания в крови белка р24. Он приходится на период формирования СПИДа. Существующие тест-системы ИФА для детекции антигена р24 используются для раннего обнаружения ВИЧ у доноров крови и детей, определения прогноза течения СПИДа и контроля проводимой терапии у больных СПИДом. ИФА обладает высокой аналитической чувствительностью, что позволяет обнаруживать антиген р24 ВИЧ-1 в сыворотке крови в концентрации 5-10 пкг/мл и ВИЧ-2 - менее 0,5 нг/мл, и специфичностью. Однако следует отметить, что уровень антигена р24 в крови подвержен индивидуальным вариациям, а это значит, что только 20-30% пациентов могут быть выявлены с помощью данного исследования в ранний период после инфицирования (Rose N.R. et al., 1997).

Антитела к антигену р24 классов IgM и IgG в крови появляются со 2-й недели, достигают пика в течение 2-4 недель и удерживаются на таком уровне различное время: антитела класса IgM - в течение нескольких месяцев, исчезая в течение одного года после инфицирования, а антитела IgG могут сохраняться годами.

Алгоритм диагностики ВИЧ-инфекции зависит от фазы заболевания и характеризуется изменением динамики детекционных антител различных классов (рис. 1, 2 - см. ссылку на источник выше).

Результат исследования выражается качественно - положительный или отрицательный. Отрицательный результат исследования указывает на отсутствие антител к ВИЧ-1 и ВИЧ-2 и антигена р24 в сыворотке крови.

Отрицательный результат лаборатория выдает сразу по его готовности. При получении положительного результата - выявлении антител к ВИЧ-1 и ВИЧ-2 и/или антигена р24 - во избежание ложноположительных результатов в лаборатории анализ повторяют еще 2 раза.

Вне зависимости от полученных результатов исследования проба крови пациента и результаты 3 исследований направляются лабораторией в региональный центр СПИДа для подтверждения положительного результата или верификации неопределенного результата. В таких случаях окончательный ответ по данному исследованию выдает региональный центр СПИДа.

Обнаружение ВИЧ методом полимеразной цепной реакции (качественно)

Обнаружение ВИЧ методом полимеразной цепной реакции - ПЦР (качественно) проводится с целью:

• разрешения сомнительных результатов иммуноблоттингового исследования;
• для ранней диагностики инфицирования ВИЧ;
• контроля эффективности противовирусного лечения;
• определения стадии заболевания СПИДом (переход инфицированности в заболевание).

При первичном инфицировании ВИЧ метод ПЦР позволяет выявить РНК ВИЧ в крови уже спустя 10-14 суток после инфицирования.

Результат исследования выражается качественно: положительный или отрицательный. Отрицательный результат исследования указывает на отсутствие РНК ВИЧ в крови.

Положительный результат - выявление РНК ВИЧ - свидетельствует об инфицировании пациента.

Обнаружение ВИЧ методом полимеразной цепной реакции (количественно)

ВИЧ в крови в норме отсутствует.

Прямое количественное определение РНК ВИЧ с помощью ПЦР позволяет более точно, чем определение содержания клеток CD4, предсказать скорость развития СПИДа у лиц, инфицированных ВИЧ, следовательно - более точно оценить их выживаемость. Высокое содержание вирусных частиц обычно коррелирует с выраженным нарушением иммунного статуса и низким содержанием клеток CD4. Низкое содержание вирусных частиц обычно коррелирует с более благополучным иммунным статусом и более высоким содержанием клеток CD4. Содержание вирусной РНК в крови позволяет предсказать переход заболевания в клиническую стадию. При содержании РНК-1 ВИЧ >74 100 копий/мл почти у всех пациентов развивается клиническая картина СПИДа (Senior D., Holden Е., 1996).

Вероятность развития СПИДа в 10,8 раз выше у лиц с содержанием ВИЧ-1 в крови >10 000 копий/мл, чем у лиц с содержанием ВИЧ-1 в крови <10 000 копий/мл. При ВИЧ-инфекции прогноз непосредственно определяется уровнем виремии. Снижение уровня виремии при лечении улучшает прогноз заболевания.

Группой экспертов США разработаны показания для терапии пациентов с ВИЧ. Лечение показано пациентам с количеством клеток CD4 в крови <300/мкл или уровнем РНК ВИЧ в сыворотке >20 000 копий/мл (ПЦР). Оценка результатов антиретровирусной терапии у лиц, инфицированных ВИЧ, проводится по снижению уровня сывороточной РНК ВИЧ.

При эффективном лечении уровень виремии должен снижаться в 10 раз в течение первых 8 недель и быть ниже предела чувствительности метода (ПЦР) (<500 копий/мл) через 4-6 месяцев после начала терапии.

Таким образом, на сегодняшний день в клиническую практику для диагностики ВИЧ-инфекции внедрены и используются множество методов исследования, как и для всех других вирусных инфекций. Среди них ведущая роль отводится серологическим исследованиям. Основные методы диагностики ВИЧ-инфекций представлены в таблице 3 (см. ссылку на источник выше), где они разделены в зависимости от важности каждого метода для выявления вирусов на четыре уровня:

• А - тест обычно используется для подтверждения диагноза;
• В - тест полезен в определенных обстоятельствах для диагностики отдельных форм инфекции;
• С - тест редко используется для целей диагностики, но имеет большое значение для эпидемиологических обследований;
• D - тест обычно не используется лабораториями в диагностических целях.

Поскольку для диагностики вирусных инфекций помимо выбора оптимального метода анализа не менее важно правильное определение и взятие биоматериала для исследования, в таблице 4 (см. ссылку на источник выше) приведены рекомендации по выбору оптимального биоматериала для исследования ВИЧ-инфекции.

Для мониторинга ВИЧ-инфицированных следует использовать возможности комплексного исследования иммунного статуса - количественное и функциональное определение всех его звеньев: гуморального, клеточного иммунитета и неспецифической резистентности в целом.

В современных лабораторных условиях многоэтапный принцип оценки иммунологического статуса включает определение субпопуляции лимфоцитов, иммуноглобулинов крови. При оценке показателей следует учитывать, что для ВИЧ-инфекции характерно снижение соотношения CD4/CD8 Т-клеток меньше 1. Индекс CD4/CD8 1,5-2,5 -указывает на нормергическое состояние, более 2,5 - указывает на гиперактивность, менее 1,0 - свидетельствует об иммунодефиците. Также соотношение CD4/CD8 может быть меньше 1 при тяжелом течении воспалительного процесса.

Принципиальное значение это соотношение имеет при оценке иммунной системы у больных СПИДом, потому что ВИЧ избирательно поражает и разрушает СD4-лимфоциты, в результате чего соотношение CD4/CD8 понижается до значений, значительно меньше 1.

Оценка иммунологического статуса опирается также на выявление общих или «грубых» дефектов в системе клеточного и гуморального звена иммунитета: гипергаммаглобулинемия (повышение концентрации IgA, IgM, IgG) или гипогаммаглобулинемия в терминальной стадии; увеличение концентрации циркулирующих иммунных комплексов; снижение продукции цитокинов; ослабление ответа лимфоцитов на антигены и митогены.

Нарушение соотношения популяций в общем пуле В-лимфоцитов характерно для недостаточности гуморального иммунитета. Однако эти изменения неспецифичны для ВИЧ-инфекции и могут возникать и при других заболеваниях. В комплексной оценке ряда других лабораторных показателей следует учитывать, что для ВИЧ-инфекции характерны также: анемия, лимфо- и лейкопения, тромбоцитопения, повышение уровня β2-микроглобулина и С-реактивного протеина, повышение активности трансаминаз в сыворотке крови.

Диагностика вируса иммунодефицита производится различными способами. Однако наибольшую популярность в последнее время набирают сверхчувствительные тест-систиемы. С их помощью удается выявить данный недуг на самых ранних этапах. Для этого используется антиген ВИЧ , присутствие которого в организме гарантированно указывает на неприятный и опасный диагноз. Для его обнаружение применяется несколько различных исследований.

Почему реакция ВИЧ 1, 2 антиген-антитела является наиболее достоверным показателем наличия вируса иммунодефицита?

Проверка на вирус иммунодефицита в государственных медицинских учреждениях является бесплатной. Но производится она в два этапа в том случае, если это необходимо. Изначально АГ к ВИЧ не проверяются. Первый анализ на предмет наличия или отсутствие данного заболевания направлен на выявление антител. Это ИФА -тестирование. Иммуноферментный анализ позволяет выявить людей, которые гарантировано не больны вирусом иммунодефицита (в том случае, если проверка проводилась по всем правилам).

А также условно инфицированных. Почему условно? Дело в том, что антитела к ВИЧ 1,2, в отличие от АГ к данному вирусу, выделяются в организме и по другим причинам. О чем конкретно идет речь. В первую очередь такое возможно при заболеваниях иммунной системы. При проблемах с этой жизненно важной системой организм в качестве защиты вырабатывает антитела, которые определяются посредством иммуноферментного анализа, как и те, что появляются при данном опасном недуге. Если результат ИФА оказывается положительными, больного направляют на дополнительное исследование, которое основано на выявлении реакции АГ - АТ 1,2 типа. В поликлиниках чаще всего используется иммунный блоттинг. Это самый распространенный тип анализа по обнаружению вируса иммунодефицита. С его помощью антиген и антитела к ВИЧ 1 и 2 не только выявляются, но и проверяются на прочность реакции.

Что такое антиген р24 к ВИЧ?

Прежде чем говорить о том, какими методами может быть выявлен hiv ag антиген ВИЧ, следует пояснить, что он собой представляет. Ученым давно удалось выяснить, что АГ, который маркируется в бланках анализов и в лабораториях маркировкой р24, является капсидом ретровируса. Говоря простыми словами, он является белком вируса иммунодефицита. Определение антигена ВИЧ невозможно без выявления антител первого и второго типа. Ведь АГ являются прочно связанными с антителами. Они образуются в организме в качестве иммунного ответа на появление АТ, которые, в свою очередь, являются своего рода «интервентами», направленными на разрушение иммунной системы и продуцирование опасного биологического материала.

АТ и АГ к ВИЧ 1 и 2 типа выявляются в реакции друг с другом. Первые выполняют в организме человека роль чужеродных молекул. Вторые служат своеобразными проявителями белков или полисахаридов. В случае с вирусом иммунодефицита АГ вызывают иммунный ответ. Соответственно, в медицине и науке, связанной с изучением данного заболевания, они классифицируются как иммуногены.

Р24 антиген ВИЧ 1 и 2 типа выявляются только посредством комплексного исследования биологического материала. Чаще всего для анализа используют венозную кровь. В некоторых случаях для этого подходит сперма или секреторная жидкость, выделяемая женскими половыми органами. Комбинированный анализ на ВИЧ антиген производится тремя известными способами. О каких конкретно исследованиях идет речь? Это иммунный блоттинг, комбо тест (hiv combo ВИЧ) и иммунохемилюминесцентный анализ. О каждом из них следует поговорить отдельно.

Иммунный блоттинг: антитела и антигены к ВИЧ 1 и 2

Как уже говорилось выше, иммунный блоттинг является одним из самых распространенных тестов, выявляющих антиген к ВИЧ. Каким образом он производится? Изначально у пациента берут кровь из вены. Обследование производится натощак. За тридцать - сорок минут до этого пациенту не рекомендуют курить. Суть исследования заключается в том, что если у человека в организме имеется вирус иммунодефицита 1 или 2 типа, реакция антиген - антитела является стойкой и неразрывной. Биологический материал испытуемого сначала расщепляют в специальном реактиве, затем помещают на стрипс, в качестве которого, как правило, выступает блистер с полистирольными ячейками. В результате добавления специальных реактивов, лаборант сначала выясняет, произойдет ли данная реакция, а затем при помощи неоднократных промывок крови, делает выводы о том, насколько стойкой она является. Это позволяет понять, имеется ли в организме вирус иммунодефицита, что в дальнейшем является самым важным фактором при постановке диагноза.

Анализ на ВИЧ АГ-АТ, производимый посредством иммунного блоттинга, рекомендуется сдавать не ранее, чем через четыре - пять недель после предполагаемого инфицирования. Несмотря на то, что этот тест является системой четвертого поколения, он не относится к сверхчувствительным и имеет погрешность в несколько процентов (от двух до трех).

Сверхчувствительный анализ: hiv duo ВИЧ (комбо) антитела 1, 2 типа

Анализ на ВИЧ (hiv) ag - ab (АГ-АТ) combo в отличие от иммунного блоттинга является сверхчувствительным. Специалисты в области медицины утверждают, что его применение целесообразно уже через две недели после предполагаемого инфицирования. Он направлен на исследование специфических антител, которые являются своеобразным иммунным ответом организма человека на такого интервента, как вирус иммунодефицита, а также АГ р24. Нiv duo ВИЧ антитела 1 и 2 типа также направлен на то, чтобы выявить антитела к данному опасному недугу. С его помощью удается не только обнаружить их в крови, но и определить тип заболевания.

Тест на антиген ВИЧ combo является комбинированным. С его помощью также проверяется реакция антиген-антитело, которая свидетельствует о наличии в организме страшного недуга.

Иммунохемилюминесцентный анализ: hiv 1,2 combo ВИЧ АТ-АГ ИХЛА

Тест ИХЛА на ВИЧ ат-аг также является сверхчувствительным. В основе такого исследования лежит своеобразная реакция АГ-АТ. Специфичность метода составляет порядка девяноста двух процентов, тогда как его достоверность - от девяноста восьми до девяноста девяти. Из этого можно сделать вывод о том, что погрешность у такого анализа есть, но она сравнительно невелика. И в случае необходимости легко перекрывается повторной проверкой. Применяется такой анализ уже через две или три недели после предполагаемого инфицирования.

Этот комбо тест на ВИЧ направлен на исследование венозной крови, в случае с проверкой на предмет наличия в организме вируса иммунодефицита. При выявлении других заболеваний и патологий используется моча или секреторная жидкость, которая выделяется из половых органов. АТ и АГ к вирусу иммунодефицита при ИХЛА также проверяются на реакцию. Для этого используются специальные реагенты и стрипс с ячейками. Проводимое в несколько этапов исследование позволяет быстро и точно установить диагноз или опровергнуть его.

Все вышеописанные способы диагностики вируса иммунодефицита посредством стойкой реакции АТ-АГ являются эффективными. Разнятся они лишь по допустимым срокам исследования. Решать, какой конкретно метод следует использовать, должен врач.

Синонимы : Human immunodeficiency virus antibodies, HIV antibody+antigen test, AIDS Test, Антитела к вирусу иммунодефицита человека 1, 2 и антиген p24, скрининг на ВИЧ, форма 50

В заказ

Цена со скидкой:

300 ₽

Скидка 50%

Цена со скидкой:

300 + ₽ = 300 ₽

Р. RU-NIZ р. RU-SPE р. RU-KLU р. RU-TUL р. RU-TVE р. RU-RYA р. RU-VLA р. RU-YAR р. RU-KOS р. RU-IVA р. RU-PRI р. RU-KAZ р. р. RU-VOR р. RU-UFA р. RU-KUR р. RU-ORL р. RU-KUR р. RU-ROS р. RU-SAM р. RU-VOL р. RU-ASTR р. RU-KDA р. р. RU-PEN р. RU-ME р. RU-BEL

• Описание
• Расшифровка
• Почему в Lab4U?

Срок исполнения

Анализ будет готов в течение 1 дня, исключая воскресенье (кроме дня взятия биоматериала). Вы получите результаты на эл. почту сразу по готовности.

Срок исполнения: 2 дня, исключая субботу и воскресенье (кроме дня взятия биоматериала)

Подготовка к анализу

Заранее

Не сдавайте анализ крови сразу после рентгенографии, флюорографии, УЗИ, физиопроцедур.

Накануне

За 24 часа до взятия крови:

Ограничьте жирную и жареную пищу, не принимайте алкоголь.

Исключите тяжёлые физические нагрузки.

Не менее 4х часов до сдачи крови не принимайте пищу, пейте только чистую негазированную воду.

В день сдачи

60 минут до забора крови не курить.

15-30 минут перед забором крови находиться в спокойном состоянии.

Информация об анализе

Показатель

В ответ на вторжение в организм вируса иммунодефицита человека, иммунная система вырабатывает защитные белки - антитела. В их задачу входит инактивация вируса путем присоединения к его рецепторам на поверхности клетки.

Вирус иммунодефицита может быть обнаружен лишь через несколько недель после заражения, не раньше, чем через три недели. Исследование показывает, было ли заражение и на какой стадии находится заболевание. Анализ следует проводить не ранее, чем через 2 недели после возможного заражения, и при наличии отрицательного результата повторить его через 3 и 6 недель.

Назначения

Назначается в рамках многих рутинных исследований, также при планировании беременности, перед операцией или стационарным лечением.

Специалист

Назначается терапевтом, инфекционистом

Важно

Если событие, грозящее заражением ВИЧ-инфекцией, произошло менее чем за 3 недели до тестирования, рекомендуется повторить тест.

Метод исследования - Иммунохемилюминесцентный (ИХЛА)

Материал для исследования - Сыворотка крови

Состав и результаты

Антитела к ВИЧ 1, 2 и антиген

Узнайте больше о анализах на инфекции:

Антитела к ВИЧ, характеризующие иммунный ответ организма, появляются после активации вирусной ДНК и начала активного размножения вируса, они обычно обнаруживаются в сыворотке крови через 6-12 недель после инфицирования. Однако длительность латентного периода зависит от ряда факторов: активности иммунной системы, индивидуальных и генетических особенностей организма. При данном исследовании помимо антител определяется и антиген р24 вируса. При определении антигена p24 ВИЧ-1 в образце крови пациентов на ранней стадии инфицирования с высокой вирусной нагрузкой, ВИЧ инфекция может быть выявлена приблизительно на 6 дней раньше, чем традиционными тестами для определения антител (Busch M.P., et al., 1995). Анти-ВИЧ антитела и р24 антиген ВИЧ-1 могут быть выявлены одновременно при использовании тест-систем для диагностики ВИЧ 4-го поколения. Это приводит к увеличению чувствительности и к сокращению диагностического окна по сравнению с тест-системами для определения антител к ВИЧ.

В случае обследования несовершеннолетних в возрасте до 14 лет, обследование проводится с согласия его законного представителя.

Интерпретация результатов исследования "Антитела к ВИЧ 1, 2 и антиген"

Интерпретация результатов анализов носит информационный характер, не является диагнозом и не заменяет консультации врача. Референсные значения могут отличаться от указанных в зависимости от используемого оборудования, актуальные значения будут указаны на бланке результатов.

Обследование на наличие антител к ВИЧ установлен приказами МЗ РФ и СП 3.1.5.2826-10 «Профилактика ВИЧ-инфекции» от 11.01.2011 г. и Постановлением от 21 июля 2016 года N 95 О внесении изменений в СП 3.1.5.2826-10 "Профилактика ВИЧ-инфекции". Стандартным методом лабораторной диагностики ВИЧ-инфекции служит одновременное определение антител к ВИЧ 1,2 и антигена р25/24 ВИЧ с помощью диагностических тестов ИФА и ИХЛА, разрешенных к применению в Российской Федерации в установленном порядке. Для подтверждения результатов в отношении ВИЧ применяются подтверждающие тесты (иммунный, линейный блот).

Положительный результат:

Если получен положительный результат, анализ проводится последовательно еще 2 раза с той же сывороткой. Вторая сыворотка запрашивается только в случае невозможности направления для дальнейшего исследования первой сыворотки. Если получены два положительных результата из трех постановок сыворотка считается первично-положительной и направляется в референс-лабораторию (Лаборатория диагностики ВИЧ-инфекции центра по профилактике и борьбе со СПИДом) для дальнейшего исследования методом иммуноблота.

Необходимо заметить, что 100% специфичностью не обладают даже лучшие из представленных на рынке диагностических тест-систем, так как всегда существует вероятность получения ложноположительных результатов, связанных с особенностями сыворотки крови пациента. Положительный результат пациенту выдается, только при подтвержденном методом иммуноблота анализе, врачом в запечатанном конверте вместе с копией результата иммуноблота.

Основным методом выявления ВИЧ-инфекции является проведение тестирования на антитела к ВИЧ с обязательным до- и послетестовым консультированием. Присутствие антител к ВИЧ является доказательством наличия ВИЧ-инфекции. Отрицательный результат тестирования на антитела к ВИЧ не всегда означает, что человек не инфицирован, поскольку существует период "серонегативного окна" (время между заражением ВИЧ и появлением антител, который обычно составляет около 3-х месяцев).

На основании лабораторных данных, других видов исследований и клинической картины диагноз ВИЧ-инфекции ставит врач инфекционист!

Отрицательный результат:

Антитела к ВИЧ отсутствуют.

Сомнительный результат:

При получении сомнительного результата в подтверждающем тесте выдается заключение о неопределенном результате исследования и рекомендуется повторить обследование пациента до определения статуса (через 2 недели, далее через 3, 6, 12 месяцев).

Для диагностики ВИЧ-инфекции у детей в возрасте до 18 месяцев, рожденных ВИЧ-инфицированными матерями, в связи с наличием материнских антител применяются иные подходы.

Единица измерения:

S/CO (signal/cutoff).

Референсные значения:

< 1,0 – результат отрицательный

≥ 1,0 – результат положительный

Положительный результат пациенту выдается, только при подтвержденном методом иммуноблота анализе, врачом в запечатанном конверте вместе с копией результата иммуноблота. Бланк результата содержит заключение о положительном результате без указания соотношения S/CO (signal/cutoff).

Lab4U - медицинская онлайн-лаборатория, цель которой сделать анализы удобными и доступными, чтобы Вы могли заботиться о своем здоровье. Для этого мы исключили все затраты на кассиров, администраторов, аренду и прочее, направив деньги на использование современного оборудования и реактивов от лучших мировых производителей. В лаборатории внедрена система TrakCare LAB, которая автоматизирует лабораторные исследования и сводит к минимуму влияние человеческого фактора

Итак, почему без сомнений Lab4U?

• Вам удобно выбрать назначенные анализы из каталога, либо в строке сквозного поиска, у Вас всегда под рукой точное и понятное описание подготовки к анализу и интерпретация результатов
• Lab4U моментально формирует для Вас список подходящих медцентров, остается выбрать день и время, рядом с домом, офисом, детским садом или по пути
• Вы можете заказать анализы для любого члена семьи в несколько кликов, один раз внеся их в свой личный кабинет, быстро и удобно получив результат на почту
• Анализы выгоднее средней рыночной цены до 50%, так Вы можете направить сэкономленный бюджет на дополнительные регулярные исследования или другие важные траты
• Lab4U всегда онлайн работает с каждым клиентом 7 дней в неделю, это значит что каждый Ваш вопрос и обращение видят руководители, именно за счет этого Lab4U постоянно улучшает сервис
• В личном кабинете удобно хранится архив ранее полученных результатов, вы легко сравните динамику
• Для продвинутых пользователей мы сделали и постоянно совершенствуем мобильное приложение

Мы работаем с 2012 года в 24 городах России и выполнили уже более 400 000 анализов (данные на август 2017 года)

Команда Lab4U делает все, чтобы малоприятная процедура стала простой, удобной, доступной и понятной. Сделайте Lab4U своей постоянной лабораторией

Одним из наиболее достоверных исследований на ВИЧ является ИФА (иммуноферментный анализ). Чтобы выявить наличие вируса иммунодефицита в крови, проводится тестирование на антитела. Стоит ли волноваться, если их не обнаружили? Что означает положительный результат ИФА?

Если в организм человека попал болезнетворный вирус, иммунная система начинает вырабатывать антитела к ВИЧ. Когда в исследуемой пробе крови обнаружены такие белковые соединения, это является тревожным сигналом. Велика вероятность, что человек заражен опасным вирусом. Обнаруженный антиген ВИЧ р24 говорит о том, что недавно произошло инфицирование вирусом иммунодефицита. Антиген – органическое вещество. Количество его в крови уменьшается по мере продуцирования организмом антител. Количество антител на единицу крови позволяет прогнозировать развитие болезни.

Еще одна важная характеристика – (концентрация вирусных клеток в 1 мл плазмы крови). Чем больше величина данного показателя, тем сильнее угнетена иммунная система. Она не в силах препятствовать размножению вируса.

Через какое время появляются антитела к ВИЧ

Иммуноферментный анализ на ВИЧ проводят через 3 – 4 недели после возможного заражения. Делать это раньше бессмысленно, ведь антитела еще не успели сформироваться, либо их слишком мало. Если заражение произошло, а антител ВИЧ в крови не обнаружено, то подобный тест называют ложноотрицательным. Чтобы поставить окончательный диагноз, первичной положительной реакции ВИЧ-тестов недостаточно. Гарантом достоверности исследований является перепроверка. Новую диагностику выполняют спустя 3 месяца и через полгода. Если все результаты положительны, назначают дополнительные тестирования.

Указанные сроки – среднестатистические. В каждом отдельном случае сроки отличаются. Если порция зараженного биоматериала, попавшего во внутренние среды организма, была велика, защитные белки – антитела – могут сформироваться уже через неделю. Такое возможно при переливании инфицированной крови. В 0,5% случаев обнаружить ВИЧ удается только через год. Подобное бывает, если количество вирусных клеток очень мало.

Сроки, когда антитела появляются в организме зараженного человека:

• в 90 – 95% случаев – через 3 месяца после предполагаемого заражения;
• в 5 – 9% случаев– через 6 мес;
• в 0,5 – 1% случаев – в более поздние сроки.

Нормы показателей на наличие антител

Антитела, или иммуноглобулины, образуются при попадании в организм чужеродных вирусов и бактерий, а также любых вредоносных органических соединений. Для каждой вирусной клетки существует свой антагонист. Образуются уникальные пары: инородная клетка + иммуноглобулин. Выявив антитела, присутствующие в организме, медики получают информацию о вирусах, которые спровоцировали их возникновение. Иммуноглобулины делят на 5 групп:

Нормальные показатели IgG (гигамоль на литр)

От 7,4 до 13,6 г/л

Взрослые от 7,8 до 18,5 г/л

Чтобы выявить антитела к ВИЧ, проводят количественный анализ. Отрицательный результат – норма для здорового человека. Положительный тест указывает на проникновение в организм вирусных частиц, против которых синтезируются защитные иммуноглобулины.

Если в графе «антитела» стоит «+», подводить итог еще рано, назначают дополнительные исследования. Не всегда причиной положительной реакции бывает заражение ВИЧ. Часто проявляются другие . Причины ложноположительных реакций:

• в первые 18 месяцев жизни в крови ребенка содержатся иммуноглобулины, полученные им от матери во время беременности;
• течение в организме аутоиммунных процессов;
• наличие ревматоидного фактора;
• прием лекарственных препаратов.

Количественный анализ помогает определить . Если число иммуноглобулинов незначительно, заболевание только начинает развиваться. Прогноз в подобном случае благоприятный. Высокая концентрация защитных белков может означать, что ВИЧ достиг завершающей стадии – СПИДа.

Выделяют ВИЧ 1 и 2 типов. Каждый из них вызывает формирование определенных антител. Определить тип антител помогает качественный анализ. В бланке такого тестирования указаны цифры 1 и 2, и данные заполнены напротив каждой из них.

Как выявляют антитела к ВИЧ

Из порции венозной крови выделяют сыворотку. Ее наносят на твердую основу и соединяют с вирусными клетками. Затем поверхность обрабатывают специальными ферментами. В крови, где изначально присутствовали вирусы иммунодефицита, после промывки вырабатываются антитела.

Человек, которому предстоит сдать кровь на антитела, за 2 дня до анализа должен отказаться от жирной и острой пищи, не пить алкогольных напитков. За 2 недели рекомендуется прекратить прием противовирусных лекарств. Любые препараты следует употреблять только при крайней необходимости. Накануне теста рекомендуется соблюдать психологический и физический покой. в утренние часы. Исследования на наличие антител признаны наиболее достоверными в диагностике ВИЧ-инфекции. Погрешность составляет не более 2%.

Показания к проведению ИФА, включая клинические признаки ВИЧ:

• постоянные рецидивы инфекционных заболеваний;
• длительная лихорадка;
• высокая вероятность заражения (незащищенные половые контакты или переливание крови от ВИЧ-позитивного человека);
• госпитализация в стационар;
• сдача донорской крови;
• или другим острым предметом, инфицированным биологическим материалом;
• перед хирургическим вмешательством.

Признаки ВИЧ могут появиться не сразу. В некоторых случаях болезнь не дает о себе знать очень долго (до 10 лет). Данный факт препятствует своевременной диагностике и лечению. Чтобы вовремя распознать вирус иммунодефицита человека, следует сдать анализы при малейшем подозрении. В случае подтверждения диагноза выявляются все половые партнеры инфицированных. Им и определить свой ВИЧ-статус. , работающий с больными ВИЧ, должен проходить плановые проверки.

Исследование специфических антител и антигена p24 вируса иммунодефицита человека.

Синонимы русские

Антитела к ВИЧ 1, 2, антитела к вирусу иммунодефицита человека, ВИЧ-1 p24, ВИЧ-1-антиген, p24-антиген.

Синонимы английские

Anti-HIV, HIV antibodies, human immunodeficiency virus antibodies, HIV-1 p24, HIV-1 Ag, p24-antigen.

Метод исследования

Электрохемилюминесцентный иммуноанализ (ECLIA).

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Венозную кровь.

Как правильно подготовиться к исследованию?

• Исследование на наличие ВИЧ-инфекции может проводиться анонимно и конфиденциально. При конфиденциальном обследовании в обязательном порядке необходимо предъявление паспорта.
• Не курить в течение 30 минут до исследования.

Общая информация об исследовании

ВИЧ (вирус иммунодефицита человека) – вирус семейства ретровирусов, который поражает клетки иммунной системы человека (CD4, Т-хелперы). Вызывает СПИД.

ВИЧ-1 – наиболее распространенный тип вируса, чаще всего встречающийся в России, США, Европе, Японии и Австралии (как правило, субтип В).

ВИЧ-2 – редкий тип, распространен в Западной Африке.

Для диагностики вируса иммунодефицита человека используется комбинированная тест-система четвертого поколения, способная определять ВИЧ-инфекцию уже через 2 недели после попадания вируса в кровь, тогда как тест-системы первого поколения делают это только через 6-12 недель с момента инфицирования.

Преимуществом этого комбинированного ВИЧ-анализа является выявление, благодаря использованию антител к ВИЧ-1 p24 в качестве реагентов, специфического антигена p24 (белка вирусного капсида), который может быть обнаружен данным тестом уже через 1-4 недели с момента инфицирования, т. е. еще до сероконверсии, что значительно сокращает "период окна".

Кроме того, такой анализ на ВИЧ выявляет в крови антитела к ВИЧ-1 и ВИЧ-2 (с использованием реакции антиген-антитело), которые вырабатываются в достаточном количестве для определения тест-системой через 2-8 недель с момента заражения.

После сероконверсии антитела начинают связываться с антигеном p24, в результате чего тест на антитела к ВИЧ будет положительным, а тест на p24 – отрицательным. Однако спустя некоторое время в крови будут определяться и антитела, и антиген одновременно. На терминальной стадии СПИД-тест на антитела к ВИЧ может давать отрицательный результат, так как нарушается механизм выработки антител.

Стадии ВИЧ-инфекции

1. Инкубационный период, или "период серонегативного окна", – время с момента заражения до выработки в крови защитных антител к вирусу, когда тесты на антитела к ВИЧ отрицательны, но человек уже может передавать вирус другим людям. Продолжительность данного периода – от 2 недель до 6 месяцев.
2. Период острой ВИЧ инфекции наступает в среднем через 2-4 недели с момента инфицирования и длится примерно 2-3 недели. На данном этапе у некоторых людей могут развиться неспецифические симптомы, схожие с симптомами гриппа, что связано с активной репликацией вируса.
3. Латентная стадия протекает бессимптомно, но в течение нее происходит постепенное снижение иммунитета и увеличение количества вируса в крови.
4. СПИД (синдром приобретенного иммунодефицита) является конечной стадией развития ВИЧ-инфекции, которая характеризуется сильным угнетением иммунной системы, а также сопутствующими заболеваниями, энцефалопатией или онкологическими заболеваниями.

Несмотря на то что ВИЧ-инфекция неизлечима, сегодня существует высокоактивная антиретровирусная терапия (АРВТ), которая может значительно продлить жизнь ВИЧ-инфицированного и улучшить ее качество.

Данный тест имеет особенно высокую диагностическую ценность, если инфицирование ВИЧ произошло незадолго до момента тестирования (за 2-4 недели).

Для чего используется исследование?

Анализ используется для ранней диагностики ВИЧ, что позволяет предотвратить дальнейшую передачу вируса другим людям, а также своевременно начать антиретровирусную терапию и лечение заболеваний, способствующих прогрессированию ВИЧ-инфекции.

Когда назначается исследование?

• При устойчивой симптоматике (на протяжении 2-3 недель) неясной этиологии: субфебрильной температуре, поносе, ночной потливости, резкой потере веса, увеличении лимфатических узлов.
• При рецидивирующей герпетической инфекции, вирусных гепатитах, пневмонии, туберкулезе, токсоплазмозе.
• Если пациент страдает заболеваниями, передающимися половым путем (сифилисом, хламидиозом, гонореей, генитальным герпесом, бактериальным вагинозом).
• Если у пациента был незащищенный вагинальный, анальный или оральный секс с несколькими половыми партнерами, новым партнером или партнером, в ВИЧ-статусе которого пациент не уверен.
• Когда пациент проходил процедуру переливания донорской крови (хотя случаи инфицирования таким путем практически исключены, т. к. кровь тщательно тестируется на наличие вирусных частиц и подвергается специальной термообработке).
• Если пациент употреблял наркотики инъекционным путем, используя нестерильные инструменты.
• При беременности / планировании беременности (прием азидотимидина во время беременности, кесарево сечение во избежание передачи вируса ребенку в момент прохождения через родовые пути и отказ от кормления грудью снижают риск передачи ВИЧ от матери к ребенку с 30 % до 1 %).
• Случайный укол шприцом или другим предметом (например, медицинским инструментом), содержащим в себе инфицированную кровь (в таких случаях вероятность инфицирования крайне низкая).

Что означают результаты?

Референсные значения

Результат: отрицательный.

Причины отрицательного результата:

• отсутствие ВИЧ-инфекции,
• период серонегативного окна (ни антиген, ни антитела еще не выработались в достаточном количестве, необходимом для определения тест-системой).

Причины положительного результата:

• инфицирование ВИЧ.



Важные замечания

• Диагностика антител к ВИЧ у детей грудного возраста, рождённых от ВИЧ-инфицированных матерей, затруднена, так как младенец получает антитела от матери через плацентарную кровь. Как правило, тест на антитела к ВИЧ у таких детей становится отрицательным не позднее 18 месяцев, если ребенок не инфицирован ВИЧ.
• С помощью данного ВИЧ-теста невозможно определить, как давно произошло инфицирование, или стадию ВИЧ (например, СПИД).
• ВИЧ содержится практически во всех жидкостях организма, но только в крови, сперме и вагинальном секрете концентрация вируса достаточна для инфицирования. Кроме того, вирус нестабилен и способен жить лишь в жидких средах человеческого организма, поэтому ВИЧ-инфекция не передается через поцелуй, укусы насекомых и при бытовых контактах (например, при использовании общего туалета, через слюну, воду и пищевые продукты).
• Данный анализ на ВИЧ хотя и сокращает "период окна", но все же способен определить наличие антигена/антител не ранее чем через 1-3 недели с момента возможного инфицирования.
• Если событие, грозящее заражением ВИЧ-инфекцией, произошло менее чем за 1-3 недели до тестирования, рекомендуется повторить тест.
• Анализы первого и третьего поколений могли давать ложноположительный результат, если в крови обследуемого присутствовали антитела к вирусу Эпштейна – Барр, ревматоидному фактору, главному комплексу гистосовместимости HLA или антитела после введения вакцины против ВИЧ. Однако вероятность ложноположительного результата при комбинированном тесте практически исключена.
• В случае положительного результата тестирования проводится подтверждающий анализ с использованием метода иммуноблотинга (тест на антитела к ряду специфических белков вируса).

Кто назначает исследование?

Врач общей практики, терапевт, инфекционист, дерматовенеролог.